بررسی اثر غلظتهای مختلف نانو ذرات نقره بر تشکیل بیوفیلم در سه جدایه از باکتریهای PGPR

عنوان دوره: بیست و یکمین کنگره گیاه پزشکی ایران

زهرا صابر باغبان؛ مسعود احمدزاده؛ کیوان بهبودی

جمعیت های متشکل از یک گونه یا گونه های متنوع باکتری به صورت چسبیده به یکدیگر یا به سطوح زنده و غیر زنده در بستری از پلی ساکاریدهای خارج سلولی را بیوفیلم می نامند. در تمام مراحل تشکیل بیوفیلم فاکتورهای ژنتیکی و محیطی دخالت دارند، بدین ترتیب در این تحقیق اثر، نانو ذرات نقره بر تشکیل بیوفیلم مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور جدایه های باکتریایی Psuedomonas fluorescens UTPF5 ، Psuedomonas fluorescens UTPF68 و Bacillus subtilis 3e استفاده شد. آزمون به روش میکروتیترپلیت انجام شد. از کشت 24 ساعته باکتری ها به محیط کشت TSB منتقل و نمونه ها به مدت 24 ساعت در شیکر انکوباتور با دمای 28 درجه سلسیوس و 135 دور در دقیقه نگهداری شدند. سپس به هر یک از چاهکها 80 میکرولیتر محیط کشت TSB، 40 میکرولیتر از غلظتهای 25/0، 5/0، 1، 2، 4 و 8 میکرولیتربرلیتر نانو ذرات نقره و در نهایت 80 میکرولیتر از سوسپانسیون باکتری ها با OD، 5/0 اضافه شدند. میکروپلیت 24 ساعت در دمای 28 درجه سلسیوس نگهداری شد. پس از آن محتویات هر یک از چاهکها با سرم فیزیولوژیک استریل شسته و باکتری های چسبیده به هر چاهک با متانول 99% فیکس و چاهکها با استفاده از کریستالویوله 2/0 رنگآمیزی شدند. در نهایت OD هر چاهک با طول موج 492 نانومتر اندازه گیری شد. غلظت 8 میکرولیتربرلیتر بیشترین تأثیر را در جلوگیری از تشکیل بیوفیلم در این سه جدایه باکتریایی داشته است. در مورد دو باکتری UTPF5 و UTPF68 ، افزایش غلظت از 25/0 تا 2 میکرولیتربرلیتر سبب افزایش تشکیل بیوفیلم شده است. که در تمامی موارد به جز غلظت 25/0 میکرولیتربرلیتر اختلاف معنی داری بین تیمارها و نمونه شاهد در این دو باکتری وجود دارد. در مورد باکتری B. subtilis 3e در غلظت 25/0 میکرولیتربرلیتر بیشترین میزان تشکیل بیوفیلم مشاهده شد که اختلاف معنی داری با شاهد داشت.

نانو ذرات نقره؛ بیوفیلم؛ باکتری