اولین گزارش از وجود Coniothyrium fuckelii عامل شانکر ساقه گل رز هلندی در ایران
عنوان دوره: بیست و دومین کنگره گیاهپزشکی ایران
نویسندگان
چکیده
گل سرخ یکی از محبوبترین گیاهان در سراسر دنیاست که قرن‌ها کاشت می‌شود. گل سرخ در حصارها، پیاده روها، ایوان ها، صخره‌ها و همچنین به صورت شاخه‌های بریده به عنوان گیاه زینتی استفاده می شود. در بهار سال 1395 گلخانه‌های کرمانشاه مورد بازدید قرار گرفتند و از گیاهان سرخ دارای علایم شانکر نمونه برداری صورت گرفت. در این بازدید سرشاخه‌ها، شاخه‌ها و طوقه گل رز با علایم زوال جمع آوری و به آزمایشگاه منتقل شدند. پس از شستشو و گندزدایی سطحی، قطعات روی محیط کشت سیب زمینی دکستروز آگار تیمار شده با کلرامفنیکل (غلظت 25 قسمت در میلیون) کشت داده شدند و در دمای 25 سانتیگراد به مدت هفت روز نگهداری شدند. جداسازی و تهیه کشت‌های خالص از قارچ‌های همراه شانکر، با استفاده از توده کنیدیوم‌های موجود در درون اندام‌های باردهی و به روش تک اسپور صورت گرفت. از قسمت‌های آلوده و دارای شانکر قارچی جدا شد که با توجه به بررسی های صورت گرفته روی خصوصیات ریخت شناختی گونه قارچی Coniothyrium fuckelii تشخیص داده شد. پرگنه این بیمارگر پس از سه روز روی محیط کشت سیب زمینی دکستروز آگار خاکستری تا سیاه بود. ریسه‌ها به رنگ قهوه‌ای کم رنگ تا تیره، سطح ریسه‌ها صاف، پیکنیدیوم‌ها تک حفره‌ای، کروی تا نیمه کروی و دارای روزنه بودند. پیکنیدیوسپورها گرد تا بیضوی شکل، تک سلولی، برنگ قهوه‌ای روشن و به ابعاد (1/2-97/2) 57/2 × (96/2-24/4) 71/3 میکرومتر بودند. برای تایید تشخیص مورفولوژیکی، دی‌ان‌ای ژنومی ایزوله ها استخراج و نواحی یگانه توالی های جدا کننده ی نسخه برداری شده ی داخلی 1، 2 و ژن 8/5 اس دی‌ان‌ای ریبوزومی جدایه های مذکور با استفاده از آغازگرهای ITS1 و ITS4 در واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر و قطعات تکثیر یافته، تعیین توالی گردیدند. پس از توالی‌یابی این ناحیه و ذخیره آن در بانک ژن (شماره دسترسی KX264328-KX264329)، نسبت به ارزیابی همولو‍ی توالی جدایه-ها با توالی‌های موجود در بانک ژن به کمک ابزار جستجوی BLASTn اقدام گردید. با استفاده از ابزار جستجوی BLAST جدایه‌های ما با دیگر جدایه های موجود در بانک ژن درجه بسیار بالای همولو‍ی نشان دادند (E-value=0.0 و تشابه 98%). در آنالیز فیلوژنتیکی به روش ماکسیمم پارسیمونی و الحاق مجاور نیز جدایه‌های ما با دیگر جدایه‌های معتبر از این گونه در یک گروه با ضریب پایداری بالا قرار گرفتند. این اولین گزارش از وجود این گونه و میزبان آن در ایران است. نمونه‌های سند در بخش گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی دانشگاه رازی نگهداری شدند. بیماریزایی این جدایه ها در شرایط گلخانه در دست بررسی است.
کلیدواژه ها